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sds page浓缩胶和分离胶
8KDa蛋白在
SDS-PAGE
电泳时
分离胶
的浓度该选择多大
答:
200 12.5 14—100 15 14—60 浓缩胶浓度低;分离胶浓度高于浓缩胶,一般不小于5%。8KD的蛋白质可能就要用Tricine–
SDS-PAGE
系统,因为
浓缩胶和分离胶
浓度太大,电泳速度很忙,很可能引起电泳带弥散。
怎么根据蛋白的分子量决定
SDS-PAGE
电泳中
分离胶和浓缩胶
的浓度
答:
分离胶
4%,
浓缩胶
12%,OK
sdspage
染色时
浓缩胶
要去掉嘛
答:
要去掉。
sdspage
染色时两块板拿下来,用刮片从长短玻片中间翘起,再把
浓缩胶
刮掉,取下。染色放于加有R250染色液的染色皿中,染液漫过胶即可。
SDSPAGE
是十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳的英文缩写,此实验也称为尿蛋白圆盘电泳。由于正常肾脏滤过小分子量蛋白较多,大分子量蛋白较少,而肾小管又可将大...
SDS
-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的实验中。当加完
分离胶
后,为何要在...
答:
这个步骤称为水封 目的是隔绝空气使催化反应快速进行,进而形成凝胶,还可使分离胶上沿平直。并且加水后,保持分离胶表面的平整性,使
浓缩胶和分离胶
都处于同一水平面上。
sds-page
的电极缓冲液
和分离胶
,
浓缩胶
缓冲液里为什么也要加入一定量的s...
答:
我的理解是在整个电泳体系中都保持一定的SDS浓度,以保证蛋白质
与SDS
的充分结合,不然可能影响电泳效果。
SDS-PAGE
电泳凝胶中各主要成分的作用?
答:
分离胶
是由AP催化聚合而成的小孔胶,凝胶缓冲液为pH8.9 Tris-HCl。电极缓冲液是pH8.3 Tris-甘氨酸缓冲液。2种孔径的凝胶、2种缓冲体系、3种pH值使不连续体系形成了凝胶孔径、pH值、缓冲液离子成分的不连续性,这是样品
浓缩
的主要因素。
SDS
是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和...
为什么
sds-page胶
跑出线状影
答:
sds-page
电泳泳道一般不会很宽的,因为用来形成泳道的梳子都是固定大小的,只有电泳时条带可能会变的很宽。这个是因为上样体积比较大的时候,比如上满整个泳道的时候,因为
浓缩胶
体积小,未能将样品完全压成一条线,在
分离胶
的时候条带就容易扩散。所以电泳时条带可能会变的很宽。另外就是电流电压的...
western blot 为什么要用两种
胶
而电泳DNA或RNA时用一种胶
答:
你是指积层
胶和分离胶
吧?因为使用两层胶可以是条带更锐利。积层胶又叫
浓缩胶
,是一老外最先开始做的。由于浓缩胶是低浓度的聚丙烯酰胺凝胶,具有较大的孔径,各种蛋白质都可以不受凝胶孔径阻碍而自由通过。而且浓缩胶通常pH值较低(如pH6.8),这样离子迁移速度不一致,所以样品进入分离胶前将浓缩成...
有人有western blot的Tris-乙酸胶的配方吗?还有相关电泳液的配方?急...
答:
三、配制Tris-甘氨酸
SDS
聚丙烯酰胺凝胶电泳
分离胶
所用溶液 表1.配制Tris-甘氨酸SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液成分 配制不同体积和浓度凝胶所需各成分的体积/mL 5 10 15 20 25 30 40 50 10 %胶 水 1.9 4.0 5.9 7.9 9.9 11.9 15.9 19.8 30 %丙烯酰胺混合液 1.7 3.3 5.0...
western-blot实验步骤
答:
1.收集蛋白样品(Protein sample preparation)使用细胞裂解液,对贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品进行裂解。然后测定每个蛋白样品的蛋白浓度。2. 电泳(Electrophoresis)(1)
SDS-PAGE
凝胶配制 SDS-PAGE凝胶(
分离胶及浓缩胶
)可以参考一些文献资料进行配制 (2) 样品处理 在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE...
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